Analyse der Expression und Mutation von Casein Kinase 1 Isoformen in malignen Lymphomen

Abstract

Maligne Lymphome stellen eine heterogene Gruppe bösartiger Erkrankungen des lymphatischen Systems dar. Um auch solche Lymphomerkrankungen heilen zu können, die auf bisher etablierte Therapieansätze nicht zufriedenstellend ansprechen, wird intensiv nach neuen Behandlungsmöglichkeiten gesucht. Proteinkinasen der Casein Kinase 1 (CK1)-Familie beeinflussen als Bestandteil wichtiger zellulärer Regelkreise die Proliferation, Migration und Apoptose. Sie wären daher mögliche Zielmoleküle einer pharmakologischen Therapie. CK1-Genmutationen oder Veränderungen des Expressionsniveaus könnten diese Regelkreise stören und so einen Überlebensvorteil für die betroffene Zellpopulation bewirken. Das Ziel der vorliegenden Arbeit war daher die Bestimmung des Mutations- und Expressionsstatus von CK1 in malignen Lymphomen. Untersucht wurden die CK1 Isoformen alpha, delta und epsilon in 19 Lymphomzelllinien. Nach Amplifikation mittels Reverser Transkriptase-Polymerase-Kettenreaktion (RT-PCR) wurden die Gensequenzen der kodierenden komplementären Desoxyribonukleinsäure (cDNA) sowie die Expression der messenger Ribonukleinsäure (mRNA) durch quantitative Echtzeit-Polymerase-Kettenreaktion (qRT-PCR) ermittelt. Weiterhin wurde die Proteinexpression durch eine Western Blot-Analyse untersucht. Die Untersuchungsergebnisse zeigen einen Wildtyp der Aminosäuresequenz in fast allen Lymphomzelllinien. Einzige Ausnahme ist eine CK1epsilon-Mutation (N78D) unklarer biologischer Bedeutung der cHL-Zelllinie HDLM2. In allen Zelllinien werden die drei CK1-Isoformen als mRNA und Protein konstitutiv und mit relativ geringen Unterschieden zwischen den Lymphomentitäten exprimiert. Die Ergebnisse der Mutations- und Expressionsanalysen sprechen für eine Abhängigkeit der Lymphomzellen von einer intakten CK1-Funktion im Sinne einer non-oncogene addiction (NOA). Somit könnten die CK1-Isoformen Zielmoleküle einer pharmakologischen Inhibierung und einer möglichen medikamentösen Lymphomtherapie darstellen.