Casein Kinase 1 delta (CK1delta) und Kolorektale Karzinome: Nachweis von Mutationen in der Kinasedomäne von CK1delta sowie Validierung der Effekte von IC261 (3-[(2,4,6-trimethoxyphenyl)-methylidenyl]-indolin-2-one) in Kolontumorzelllinien.

Abstract

Kolorektale Karzinome haben eine multifaktorielle Genese. Daher können sowohl Mutationen in der kodierenden Region von CK1δ, als auch Veränderungen in der Expression zur Tumorgenese und Tumorproliferation beitragen. In dieser Arbeit wurden zum einen einzelne Exone der Kinasedomäne von CK1delta mit Hilfe Intronspezifischer Primer amplifiziert und anschließend beide DNA-Stränge sequenziert. Die 69 analysierten Sequenzen des Exons 2 (111 bp) wiesen keine Mutation auf. In Exon 3 (147 bp) von CK1delta wurden bei insgesamt vier Patienten Mutationen gefunden. Die Sequenzen des Exons 4 entsprachen in allen 67 untersuchten Patientenproben dem Wildtyp. Für das Exon 5, welches die Substratbindungsstelle enthält, wurden in der Basenpaarsequenz von Patient 17 insgesamt sieben Mutationen nachgewiesen. Inwieweit die in dieser Arbeit nachgewiesenen Mutationen das onkogene Potential von CK1delta erhöhen, muss durch weiterführende Untersuchungen geklärt werden. Die im zweiten Teil dieser Arbeit durchgeführten MTT- und FACS-Analysen ergaben, dass IC261 (3-[(2,4,6-trimethoxyphenyl)-methylidenyl]-indolin-2-one), der in vitro CK1delta und epsilon spezifisch inhibiert, das Wachstum in den etablierten Kolonkarzinomzelllinien HT29, SW480 und SW620 Dosis-abhängig hemmt. Ob diese Inhibition der Tumorzellproliferation eine Folge der spezifischen Hemmung von CK1delta/epsilon oder vielmehr Folge der Depolymerisation von Mikrotubuli darstellt, muss in weiterführenden Studien eingehend untersucht werden.