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Veränderungen des alpha-beta-T-Zell-Rezeptor-Repertoires der zytotoxischen T-Lymphozyten im peripheren Blut bei akuter Hepatitis C-Infektion

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vts_1383.pdf (4.105Mb)
172 Seiten
Veröffentlichung
2002-05-06
Authors
Höpfner, Marco
Dissertation


Faculties
Medizinische Fakultät
Abstract
Es sollte untersucht werden, wie sich das Repertoire an alpha-beta-T-Zell-Rezeptoren (TCR-Repertoire) der zytotoxischen T-Lymphozyten (CTL) im peripheren Blut im Rahmen der akuten Hepatitis C-Infektion verändert. Zwei Patienten mit akuter Hepatitis C-Infektion wurden in Form einer Longitudinalstudie über 16 Monate untersucht. Die Verschiebung des TCR-Repertoires wurde anhand der Längenverteilung der hochvariablen Region CDR3 (Complementary determining region) der T-Zell-Rezeptor-Gene beurteilt. Nach mRNA-Isolierung und anschließender cDNA-Synthese wurde eine quantitative, familienspezifische PCR (Q-PCR) durchgeführt (59 verschiedene familienspezifische Primer). Das CDR3-Längenverteilungsmuster wurde für alle TCR-Familien beider Patienten zu verschiedenen Zeitpunkten der Hepatitis C-Infektion untersucht. Durch die kompetitive Amplifikation eines exogenen, heterologen Standard-DNA-Moleküls in der PCR konnten die Ergebnisse quantifiziert werden. In einer anschließenden Sequenzierung der CDR3-Region der auffälligsten Expansionen wurde deren Klonalitätsgrad ermittelt. In Korrelation mit dem klinischen Verlauf konnten einige Expansionen innerhalb des TCR-Repertoires zum Zeitpunkt der akuten Hepatitis C identifiziert werden, die mit hoher Wahrscheinlichkeit HCV-spezifisch sind. Auch ist jeweils die Verschiebung des TCR-Repertoires insgesamt in der Phase der akuten Hepatitis C stärker ausgeprägt als in späteren Phasen (chronische Virämie, unter Therapie oder nach erfolgter Viruselimination). Es konnte gezeigt werden, dass sich multiple Veränderungen im TCR-Repertoire sehr kurzfristig abspielen, was sie von den persistierenden Expansionen abgrenzt, die ebenfalls gefunden wurden. Die Sequenzierung der aufgefallenen Expansionen erbrachte zumeist einen hohen Klonalitätsanteil oder einige sehr ähnliche Sequenzen. Ein Befund, der die HCV-Spezifität der expandierten Klone unterstreicht.
Date created
2000
Subject headings
[GND]: Polymerase-Kettenreaktion
[MeSH]: Hepatitis C | T-lymphocytes, cytotoxic
[Free subject headings]: Akute Hepatitis C | Complementary determining region 3 <CDR3> | Quantitative, familienspezifische PCR <Q-PCR> | T-Zell-Rezeptoren <TCR> | Zytotoxische T-Zellen <CTL>
License
Standard (Fassung vom 03.05.2003)
https://oparu.uni-ulm.de/xmlui/license_v1

Metadata
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DOI & citation

Please use this identifier to cite or link to this item: http://dx.doi.org/10.18725/OPARU-164

Höpfner, Marco (2002): Veränderungen des alpha-beta-T-Zell-Rezeptor-Repertoires der zytotoxischen T-Lymphozyten im peripheren Blut bei akuter Hepatitis C-Infektion. Open Access Repositorium der Universität Ulm und Technischen Hochschule Ulm. Dissertation. http://dx.doi.org/10.18725/OPARU-164
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