• English
    • Deutsch
  • English 
    • English
    • Deutsch
  • Login
View Item 
  •   Home
  • Universität Ulm / Medizin
  • Publikationen
  • View Item
  •   Home
  • Universität Ulm / Medizin
  • Publikationen
  • View Item
JavaScript is disabled for your browser. Some features of this site may not work without it.

Transfektion von Tumorzellen mit triplexbildenden Oligodeoxynukleotiden zur Inhibierung der Expression von Bcl-2 und Survivin

Thumbnail
vts_6595_9005.pdf (5.722Mb)
107 Seiten
Veröffentlichung
2008-11-27
Authors
Polat, Bülent
Dissertation


Faculties
Medizinische Fakultät
Abstract
Triplexbildende Oligonukleotide (TBO) können sequenzspezifisch durch Ausbilden einer Tripelhelix an der DNA die Expression geeigneter Zielgene modifizieren. Es ist hierdurch eine effiziente Gen-Inhibition möglich, die im Vergleich zum Antisense Ansatz aufgrund der geringeren Anzahl der Zielstrukturen in den Zellen deutlich im Vorteil ist. In der vorliegenden Arbeit konnten mehrere potentielle TBO Bindungsstellen im Bcl-2 und Survivin Gen identifiziert und passende Oligonukleotide synthetisiert werden. Im "electrophoretic mobility shift assay" (EMSA) konnten wir eine spezifische Bindung der TBO an die Ziel-DNA aufzeigen. Die spezifische Hemmung der Proteinexpression konnten wir in vitro mit einem speziellen Tet-on Expressionssystem sowie mit einem Luciferase-Reportergen nachweisen. Um die Wirkung der TBO in vivo auf die Expression von bcl-2 und survivin zu untersuchen, wurden diese mit Hilfe von Aufnahme verstärkenden Liposomen transfiziert. Die gegen die Promotorregion und die 3’ untranslatierte Region (3’UTR) gerichteten TBO konnten stabile Triplexe in vitro ausbilden. Im Tet-on Expressionssystem sowie im Luciferase-Reporter System konnten diese TBO die Expression des bcl-2 Proto-onkogens in transient transfizierten HeLa Zellen unterdrücken. Analoge Ergebnisse ließen sich auch am survivin Gen nachweisen. Darüber hinaus zeigten die letztgenannten TBO nicht nur einen in vitro Effekt sondern konnten auch in vivo die Proteinsynthese und Zellproliferation hemmen sowie Apoptose induzieren. Auch mit dem Einsatz transfektionsverbessernder Liposome war es allerdings nicht gelungen, die Bcl-2 Produktion in den Zellen der Lymphomzellinie (DoHH2) effektiv zu blockieren. Insgesamt implizieren die Ergebnisse eine Ausweitung der möglichen TBO Zielsequenzen von der Promotorregion auf die 3’ untranslatierte Region eines beliebigen Zielgens. Es bedarf in Zukunft allerdings noch weiterer Studien um die hier verwendeten Oligonukleotide für klinische Anwendungen einzusetzen.
Date created
2008
Subject headings
[GND]: Transfektion
[Free subject headings]: Bcl-2-associated X protein | Survivin | Triplexbildende Oligodeoxynukleotide
[DDC subject group]: DDC 610 / Medicine & health
License
Standard (Fassung vom 01.10.2008)
https://oparu.uni-ulm.de/xmlui/license_v2

Metadata
Show full item record

DOI & citation

Please use this identifier to cite or link to this item: http://dx.doi.org/10.18725/OPARU-1511

Polat, Bülent (2008): Transfektion von Tumorzellen mit triplexbildenden Oligodeoxynukleotiden zur Inhibierung der Expression von Bcl-2 und Survivin. Open Access Repositorium der Universität Ulm und Technischen Hochschule Ulm. Dissertation. http://dx.doi.org/10.18725/OPARU-1511
Citation formatter >



Policy | kiz service OPARU | Contact Us
Impressum | Privacy statement
 

 

Advanced Search

Browse

All of OPARUCommunities & CollectionsPersonsInstitutionsPublication typesUlm SerialsDewey Decimal ClassesEU projects UlmDFG projects UlmOther projects Ulm

My Account

LoginRegister

Statistics

View Usage Statistics

Policy | kiz service OPARU | Contact Us
Impressum | Privacy statement